样本的处理方法
1.动物组织
RNA样品保存液不会破坏或者溶解组织结构。浸泡在保存液中并达到渗透平衡的组织可以从RNA样品保存液中取出,按需切成小块,剩余的样本仍可以放回到RNA样品保存液中继续存放。体积较小的器官如小鼠的肝、肾和脾脏不需要剪切,可以完整地存放在RNA样品保存液中。
2.植物组织
很多植物组织直接浸泡在RNA样品保存液中即可,有的植物有天然渗透屏障如蜡质保护层,需要先破坏掉蜡质层,便于RNA样品保存液渗透。
3.组织培养细胞
细胞吹打下来后,离心收集细胞,去除上清液,然后用冰浴的PBS缓冲液清洗一次,去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中,加入5-10倍体积的RNA样品保存液,混匀。
4.血和血浆
将白细胞从红细胞和血清中分离出来,参照组织培养细胞的保存流程进行操作。
对于少量的抗凝全血、血清和血浆,可以加入3倍体积的RNA样品保存液,混匀。
5.酵母
离心收集3×108个细胞(大于12,000×g,离心2min),去除上清液后,立即将细胞团重悬在0.5-1ml的RNA样品保存液中。酵母细胞可以在25℃的RNA样品保存液中保存8小时或4℃条件下保存一周。
如果需要长期保存,将酵母细胞在RNA样品保存液中放置1小时后,在12,000×g,离心5min,去除上清液后,将酵母细胞团放入液氮速冻,再置于-80℃存放。
6.细菌
RNA样品保存液能够抑制细菌生长,但并不会破坏细菌,细菌的结构仍保持完整。E.coli在4℃RNA样品保存液中存放一个月,仍可以提取出完整的RNA。